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技术支持

影响细胞株冻存的因素?乔羽生物告诉您
发布时间:2018-09-25   点击次数:184次

      你们细胞是怎么冻存的?求解!!!我的是4度冰箱放半小时,-20度冰箱半小时,然后转移到-80度冰箱!但是放在-80度冰箱1个月后,细胞复苏就感觉状态不太好了!!

      做实验前要先学会冻存,以备自己在后面的实验中能保持同一来源、稳定可靠的细胞,且可减少污染或其它不利影响。

影响冻存细胞活性的因素

(1)细胞冻存保护剂:常用的有二甲基亚砜(DMSO)和甘油,常用的浓度为5%-10%(90%小牛血清)。DMSO对二倍体细胞的毒性较甘油小。

(2)细胞悬液的冻结速度:慢冻时冰冻在细胞外形成,因此不致损害细胞。多数细胞以每分钟下降1℃的速度,降至-20℃冻结。均可获得满意效果。

(3)保存温度:液氮罐,可达到-196℃,此时所有的物理化学活动均降至zui低限度,以保证细胞长期保存。

(4)复苏:急速融化复苏可防止损害细胞。冻结细胞从液氮中取出后,应立即放入37℃~43℃的水浴中,30秒至一分钟内融化。

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